如何收集細胞進行實驗檢測

1、應該選用處于對數生長期，狀態良好的細胞用于實驗。

2、細胞應處于70%左右融合，形態飽滿，折光性好。提前24小時換無血清培養基，避免血清干擾，控制細胞生長速度。

3、選擇適當的分離液，避免所分離的細胞表面受體和其他標記分子被遮蓋。

4、酚紅有類似雌激素作用，HIEC正常人腸上皮細胞為避免類固醇反應，某些檢測使用的細胞要用不加酚紅的培養基。

5、盡量使用傳代數少的細胞進行實驗，原代培養細胞建議在10代以內用于實驗。

6、在轉染實驗中，從細胞種植到轉染后72小時期間，避免使用抗生素。

7、為避免細胞老化和性狀發生改變，請及時凍存細胞。慎重添加生長因子。

8、用于轉染的細胞，轉染前一日應重新鋪板，密度以鋪滿培養器皿60%左右。轉染前4小時重新換液。

9、轉染后48小時即可進行靶基因表達檢測。

培養基的選擇和使用

MEM：成分簡單，貼壁細胞首選。

DMEM：分高糖型和低糖型。

IDMEM：適合細胞密度低，生長困難的細胞。如雜交細胞的篩選，DNA轉染后轉化細胞的篩選培養。

RPM1640：應用最廣泛的培養基之一。懸浮細胞培養首選，主要針對淋巴細胞，也適合其他細胞。

199、109培養基：成分齊全，培養效果較好。

F10培養基：適合小鼠及人類二倍體細胞培養。

F12培養基：適合單細胞分離培養及無血清培養。

McCoy’s5A培養基：特別適合原代細胞及較難培養細胞的生長。
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